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解析10437-028胎牛血清做熱滅活試驗是否是必然的

2017-10-24 瀏覽次數:1351

  為什么要熱滅活10437-028胎牛血清?
  加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞、平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活10437-028胎牛血清

10437-028胎牛血清


  熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質,在對補體滅活以外,還可去除血清中的支原體的污染。常規滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時間則從15分鐘到60分鐘不等,其中zui常用的就是56℃熱處理30分鐘。現在好像不主張熱滅活,熱滅活經常給血清產品帶來負面影響,對血清的加熱經常導致血清中沉淀的產生,此外,有研究結果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用。
  10437-028胎牛血清熱滅活處理步驟:
  1、選用與血清瓶同規格的對照瓶一個。
  2、對照瓶內放入與血清等體積的水。
  3、溫度預試
  4、血清滅活:血清瓶與帶溫度計的對照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計所示溫度上升至56℃時,定時30分鐘。
  5、大瓶血清滅活后,進行分裝,在-20到-70℃保存。
  有必要做熱滅活嗎?
  實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
  若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節省時間,更確保血清的質量!

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