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2019-08-30 瀏覽次數(shù)：2370

　　胎牛血清的制備流程非常嚴(yán)格，放心使用

　　1、血清來源：可從世界各國收集胎牛血清，但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。地方當(dāng)局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集，有說明血清質(zhì)量的證明資料：包括收集過程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況。

　　2、血清的收集：胎牛血清是心臟穿刺取血，新生牛(10～14天)和小牛(10個(gè)月內(nèi))血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)：低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。

　　3、血清的制備：

　　a. 超低IgG胎牛血清：通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量減到zui低，一般IgG≤5ug/ml，生物學(xué)活性不變。

　　b. 血清透析：用12000～14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過氧化酶方法測定)。

　　c. γ-射線照射：已經(jīng)證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30～45KG。而且這個(gè)劑量的γ-射線照射不會改變血清的理化性質(zhì)和對細(xì)胞培養(yǎng)的影響。

　　4、除菌過濾:經(jīng)過上述處理的粗制血清再經(jīng)過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要通過三層0.1微米濾膜，其他血清可通過0.2微米濾膜。

胎牛血清

　　成品血清質(zhì)量檢定

　　1)化學(xué)檢定：滲透壓pH

　　蛋白含量――電泳法

　　白蛋白球蛋白血紅蛋白

　　隨著牛年齡增加血清中總蛋白含量相應(yīng)增加，總的血清蛋白含量可以確定產(chǎn)品規(guī)格和年齡。

　　2) 微生物學(xué)檢查：細(xì)菌、真菌符合USP標(biāo)準(zhǔn)。

　　支原體：在支原體專業(yè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)了3～4周，培養(yǎng)溫度36℃±2℃

　　分別在需氧和厭氧條件下進(jìn)行，有的還需要在支原體瓊脂培養(yǎng)皿上傳4次，Hoechst熒光素DNA染色檢查那些培養(yǎng)法

　　無法檢出的支原體如豬鼻支原體等。

　　3)內(nèi)毒素檢測

　　用鱟試劑檢查。

　　4)細(xì)菌噬菌體檢查

　　主要檢查E.Coli(C300 or K-12)噬菌體。

　　5)激素含量測定

　　每批FBS對某些激素含量都要進(jìn)行測定，包括：雌二醇、胰島素、孕硐、睪wan素、甲狀腺素等。

　　6)血紅蛋白檢測

　　血紅蛋白與氧合血紅蛋白的比≥70%，血紅蛋白含量≤mg15/dl。

　　7)細(xì)胞生長效果測定

　　細(xì)胞克隆效果測定，細(xì)胞選擇：Sp20/Ag-14 或P3X63-Ag8.653。