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原代細胞與細胞系怎么選擇?

2023-04-11 瀏覽次數(shù):858

原代細胞生長緩慢,一般認(rèn)為,原代細胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長會出現(xiàn)停滯,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去,這些存活的細胞一般能夠傳到40-50代,這種傳代細胞叫做細胞株。當(dāng)細胞傳至50代以后又會出現(xiàn)“危機",這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c,從而可能無限制地傳代下去,這種傳代細胞稱為細胞系。
細胞系因其容易培養(yǎng)、種類多、產(chǎn)量可觀的優(yōu)點一直是細胞水平研究的Shou選,且價格相對低廉,但細胞系“價廉卻不一定物美"。研究發(fā)現(xiàn),細胞系在連續(xù)培養(yǎng)的過程會不斷發(fā)生突變,長時間的多次傳代可能會導(dǎo)致細胞系的基因型和表型都發(fā)生變化,從而影響實驗結(jié)果。例如有研究報道,HEK293經(jīng)腺病毒轉(zhuǎn)染后得到的細胞更接近未成熟神經(jīng)元細胞;MDA-435作為乳腺癌細胞被廣泛用于各種研究,但近年來越來越多證據(jù)表明其可能為一種黑色素瘤細胞。

原代細胞則不存在這些問題,雖然原代細胞分離和培養(yǎng)的成本可能相對更高,但原代細胞作為更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型,可讓你的研究結(jié)論更加接近“事實",且原代細胞的使用可減少動物實驗所需的成本開支。另外在某些人體體內(nèi)無法進行的實驗,原代細胞因其高度保持了在體內(nèi)的生物學(xué)特性,可在一定程度解決這個問題。

由于永生化的細胞系與體內(nèi)組織細胞的生物特性相差甚遠,導(dǎo)致許多生理和病理的過程難以重復(fù),近年來,原代細胞正逐步成為細胞和分子生物學(xué)研究的Shou選工具,為疾病機制、藥物研發(fā)等提供了高質(zhì)量的模型。但不可能否認(rèn)的是,細胞系在科研中的地位仍十分重要,例如在標(biāo)準(zhǔn)化方案的確立上細胞系是良好的工具,某些需要大量細胞的研究如全基因組遺傳篩選,由于原代細胞數(shù)量有限且對培養(yǎng)條件要求苛刻,細胞系也是Di一選擇。

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