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D341 Med細(xì)胞,DAN-G細(xì)胞株的復(fù)蘇和傳代

2017-02-24 瀏覽次數(shù):1615

D341 Med細(xì)胞,DAN-G細(xì)胞株的復(fù)蘇和傳代

產(chǎn)品名稱:D341 Med細(xì)胞

中文名稱:

貨號(hào):D341 Med

規(guī)格:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

上海蒂科生物 細(xì)胞株、血清、培養(yǎng)基、 各種細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,開學(xué)酬賓*中,更多產(chǎn)品,更大優(yōu)惠,敬請(qǐng)??!

復(fù)蘇時(shí),從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2~3實(shí)驗(yàn)。

 

用于檢測(cè)細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)細(xì)胞因子依賴細(xì)胞株還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),3~4天傳代一次。

懸浮生長細(xì)胞的傳代:

直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

帖壁生長細(xì)胞的傳代:

吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細(xì)胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細(xì)胞開始脫落時(shí),倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細(xì)胞。也可以待細(xì)胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

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